کیت تشخیص کرونا جدید MSDS

کیت تشخیص نوکلئیک اسید نوکلئیک ویروس کرونا (COVID-19).

 

کیت تشخیص اسید نوکلئیک کروناویروس جدید (COVID-19) برای تشخیص کیفی طراحی شده است.

RNA SARS-CoV-2در نمونه های سواب بینی/گلو.

 

برای موارد مشکوک، موارد مشکوک خوشه ای، یا موارد دیگری که نیاز به تشخیص دارند

و تشخیص افتراقی عفونت SARS-CoV-2، که به تشخیص بالینی کمک می کند

از عفونت SARS-CoV-2.

 

 

[بسته بندی]

 

50 تست / کیت و 200 تست / کیت

 

[استفاده در نظر گرفته شده]

 

این کیت برای تشخیص COVID-19 (ژن ORF1ab/N) نوکلئیک اسید و کمکی استفاده می شود.

تشخیص و نظارت اپیدمیولوژیک COVID-19.

 

[اصل آزمون]

 

این کیت از اصل فناوری PCR کمی فلورسنت در زمان واقعی استفاده می کند

پرایمرها و کاوشگرهای خاص برای COVID-19 (ژن ORF1ab/N) و آنها را با آنها ترکیب می کند

ابزار PCR کمی فلورسنت بلادرنگ برای تشخیص نوکلئیک اسید COVID-19

ویروس.به منظور تحقق تشخیص کیفی اسید نوکلئیک ویروس COVID-19.علاوه بر این،

سیستم تشخیص PCR از کنترل داخلی مثبت استفاده می کند که حضور را نظارت می کند

مهارکننده‌های PCR در نمونه‌های آزمایشی با تشخیص اینکه آیا سیگنال کنترل داخلی وجود دارد یا خیر

طبیعی است، برای جلوگیری از یک نتیجه منفی کاذب.

 

[اجزای کیت DIGNOSTIC]

 

خیر	نام معرف	مشخصات& تعداد
		50T	200T
1	مخلوط COVID-19 PCR	750 میکرولیتر × 1 لوله	750μl× 4 لوله
2	مخلوط آنزیم COVID-19	250 میکرولیتر × 1 لوله	250μl× 4 لوله
3	کنترل منفی COVID-19	100μl × 1 لوله	100μl × 4 لوله
4	کنترل مثبت COVID-19	100μl × 1 لوله	100μl × 4 لوله
5	دستورالعمل ها	1 سروینگ	1 سروینگ

توجه داشته باشید:

1. اجزای مجموعه های مختلف کیت را مخلوط یا تعویض نکنید.

2. کنترل منفی CODID-19 آب استریل بدون هسته است و کووید-19

کنترل مثبت RNA رونویسی شده در شرایط آزمایشگاهی است که حاوی ژن های هدف ORF1ab است،

ژن N و ژن کنترل داخلی.

 

[ذخیره سازی و پایداری]

 

1. کیت تشخیصی باید در یک کیسه مهر و موم شده در دمای -20 ± ℃ ذخیره شود.تاریخ انقضا

12 ماه است.

2. لطفا به تاریخ ساخت و تاریخ انقضا در بسته بیرونی مراجعه کنید.

3. در صورت عدم استفاده، معرف در تاریخ انقضا معتبر و پایدار می ماند.کیت نباید باشد

بیش از 5 بار منجمد و ذوب شده است.

 

[ابزار قابل اجرا]

 

کیت تشخیص برای MA-6000، سری ABI، سری Bio-Rad، Roche Light Cycler قابل استفاده است.

R480، سیکلر هوشمند Cepheid، سری Rotor-Gene و سایر اطلاعات کمی چند کاناله در زمان واقعی

ابزار PCR

 

[الزامات نمونه]

 

1. انواع نمونه: نمونه های دستگاه تنفسی فوقانی (شامل سواب گلو، سواب بینی،

عصاره های نازوفارنکس، خلط سرفه عمیق)، نمونه های دستگاه تنفسی تحتانی (از جمله

عصاره های دستگاه تنفسی، مایع لاواژ برونش، مایع شستشوی آلوئولی، بیوپسی بافت ریه

نمونه ها)، کشت بافت و نمونه های دیگر.

 

2. شرایط نگهداری: نمونه های جمع آوری شده باید به موقع برای بازرسی ارسال شوند

به این ترتیب، و نمونه ها باید در 4 درجه سانتیگراد در عرض 24 ساعت نگهداری شوند.بهتر است در دمای -70 درجه سانتی گراد نگهداری شود

برای بیش از 24 ساعت، و از تکرار چرخه های انجماد و ذوب خودداری کنید.

 

[روش آزمون]

1. آماده سازی معرف (انجام شده در "منطقه آماده سازی معرف")

 

1. 1 هر یک از اجزاء را از کیت تشخیصی خارج کرده و در دمای اتاق قرار دهید.

اجازه دهید معرف ها در دمای اتاق به تعادل برسند، سپس هر یک از آنها را گرداب کنید

به ترتیببرای استفاده بعدی

1.2با توجه به تعداد نمونه های آزمایش، کنترل مثبت COVID-19 و COVID-19

کنترل منفی، مقدار مناسبی از مخلوط COVID-19 PCR و COVID-19 را پیپت کنید

آنزیم میکس (COVID-19 PCR Mix 15 میکرولیتر/تست + COVID-19 آنزیم میکس 5 میکرولیتر/آزمایش)، آنها را مخلوط کنید

برای ساختن مخلوط PCR-Master، آن را فوراً برای استفاده بعدی سانتریفیوژ کنید.

 

نام معرف	1 نمونه	10 نمونه	25 نمونه	50 نمونه	100 نمونه	200 نمونه
COVID-19 PCR Mix (μl)	15	150	375	750	1500	3000
آنزیم COVID-19 مخلوط (μl)	5	50	125	250	500	1000
مخلوط PCR-Master	20	200	500	1000	2000	4000
توجه داشته باشید:پیکربندی فوق فقط برای مرجع شما است و برای اطمینان از حجم کافی مخلوط PCR-Master، ممکن است حجم بیشتری از پیپتینگ واقعی مورد نیاز باشد.

 

 

1.3معرف های آماده شده در بالا را به "فرآوری نمونه" منتقل کنید منطقه” برای استفاده بعدی.

 

2. پردازش و بارگذاری نمونه ها (انجام شده در«فرآوری نمونه

منطقه»)

 

2.1این کیت تشخیصی شامل کیت استخراج RNA و DNA ویروسی نمی شود.  

توصیه می شود از کیت استخراج RNA و DNA ویروسی استفاده کنیدبرای استخراج RNA ویروسی

عملیات خاص مطابق با دستورالعمل آن است.

 

2.2 20 میکرولیتر مخلوط PCR-Master را به لوله واکنش PCR با 5 میکرولیتر بالا اضافه کنید. نمونه پردازش شده،

کنترل مثبت کووید-19 و کنترل منفی کووید-19، و لوله را درپوش بگذارید.انجام دادن

تشخیص کمی PCR فلورسانس در دستگاه PCR فلورسانس

 

3. تقویت PCR (در منطقه تقویت اسید نوکلئیک انجام می شود)

 

3.1 لوله های واکنش PCR را در چاهک های نمونه تقویت کننده قرار دهید

تجهیزات.کنترل مثبت COVID-19، COVID-19 منفی را تنظیم کنید

کنترل و نمونه ها در ترتیب مربوطه آزمایش شوند

و نام نمونه ورودی

 

3.2 پارامترهای چرخه را مطابق جدول زیر برای PCR تنظیم کنید تقویت

 

مراحل	درجه حرارت	زمان	چرخه ها
1	50 درجه سانتیگراد	10 دقیقه	1
2	95 درجه سانتیگراد	3 دقیقه	1
3	95 درجه سانتیگراد	دهه 10	40
	55 درجه سانتیگراد	دهه 30

 

توجه داشته باشید:

 

1) مجموعه فلورسانس در "مرحله 3: 55 درجه سانتیگراد، 30 ثانیه" تنظیم شده است.انتخاب کانال های تشخیص:

FAM، HEX و Cy5 که کانال FAM ORF1abgene و کانال HEX ژن N است.Cy5

کانال ژن کنترل داخلی است و سیستم واکنش روی 25 میکرولیتر تنظیم شده است.

دستگاه‌های PCR فلورسنت سری ABI کالیبراسیون ROX را انتخاب نمی‌کنند و None را برای انتخاب می‌کنند

گروه خاموش کننده

[ارزش قضاوت مثبت و فاصله مرجع]

 

1. تنظیم شرایط برای تجزیه و تحلیل نتایج

 

اصل تعدیل پایه و آستانه عموماً بر اساس نتایج است

تجزیه و تحلیل خودکار ابزاروقتی شیب کلی منحنی ظاهر شد، Start،

مقادیر End و Threshold Baseline را می توان مطابق تصویر تنظیم کرد.معمولا،

کاربر می تواند آن را با توجه به وضعیت واقعی تنظیم کند.مقدار Start را می توان روی 3 - 15 تنظیم کرد،

و مقدار End را می توان روی 5 - 20 تنظیم کرد. منحنی تقویت کنترل منفی را تنظیم کنید.

تا آن را مستقیم یا زیر خط آستانه درست کنید.

 

2. اعتبار کیت

 

2.1 کنترل مثبت COVID-19: کانال های FAM، HEX و Cy5 دارای نوع S معمولی هستند.

منحنی های تقویت و Ct≤32.

2.2 کنترل منفی COVID-19: کانال های FAM، HEX و Cy5 فاقد Ct یا Ct >38 هستند.

2.3 توجه: شرایط فوق باید به طور همزمان رعایت شود، در غیر این صورت این آزمایش است

نامعتبر است و نیاز به تکرار دارد.

 

3. ارزش قضاوت مثبت

از طریق مطالعه مقادیر مرجع، مشخص شد که مقدار مرجع Ct از

ژن هدف و ژن کنترل داخلی شناسایی شده توسط این کیت هر دو 38 بود.

 

نمونه قضاوت نتیجه

 

1. اگر نمونه آزمایشی منحنی تقویت نوع S را در FAM، HEX و Cy5 تشخیص دهد.

      کانال ها و Ct ≤38 است، نمونه را می توان مثبت COVID-19 ارزیابی کرد.

2. اگر نمونه آزمایشی فاقد Ct یا Ct > 38 در کانال های FAM و HEX باشد و یک نمونه معمولی وجود داشته باشد.

منحنی تقویت نوع S در کانال کنترل داخلی (Cy5)، Ct≤38، نمونه را می توان

تشخیص داده شد که کووید-19 منفی است.

3. اگر نمونه آزمایشی فقط دارای مقدار Ct ≤38 در یک کانال واحد از کانال FAM یا HEX باشد،

و یک منحنی تقویتی نوع S در کانال کنترل داخلی (Cy5) وجود دارد.

Ct ≤38، نتایج نیاز به آزمایش مجدد دارند.اگر نتایج تکرار شده سازگار باشد، نمونه می تواند باشد

در نظر گرفته شده به عنوان COVID-19 مثبت، نتایج تکرار شده به جز برای نوع S معمولی منفی است

      منحنی تقویت کانال کنترل داخلی (Cy5)، Ct≤38، که می تواند به عنوان قضاوت شود

COVID-19 منفی است.

4. اگر هیچ منحنی تقویتی معمولی نوع S (بدون مقدار Ct) یا مقدار Ct> 38 در FAM شناسایی نشد،

کانال های HEX و Cy5 نمونه آزمایشی به این معنی است که کیفیت آن مشکل دارد

نمونه یا مشکلی در عملیاتاگر نتیجه نامعتبر است، باید و را پیدا کنید

علت را از بین ببرید، نمونه را دوباره جمع آوری کنید و آزمایش را تکرار کنید (اگر نتیجه آزمایش هنوز ثابت باشد

بی اعتبار، لطفا با شرکت تماس بگیرید).

 

[محدودیت های روش تشخیص]

 

1. نتایج آزمایش کیت تشخیصی فقط برای مرجع کلینیک قابل استفاده است.تشخیص بالینی

و درمان بیماران باید همراه با علائم، علائم،

سابقه پزشکی و سایر شرایط مرتبط

2.نتایج منفی کاذب ممکن است زمانی رخ دهد که غلظت از اسید نوکلئیک را در

نمونه آزمایشی زیر حداقل است محدودیت تشخیص این کیت

3.جابجایی نادرست نمونه آزمایش شده در هنگام جمع آوری، حمل و نقل، ذخیره سازی، و

پردازش به راحتی می تواند منجر به تخریب RNA و نتایج منفی کاذب شود.

4. هنگامی که نمونه ها در طول جمع آوری آلوده می شوند، حمل و نقل، ذخیره سازی و

پردازش، بدست آوردن نتایج مثبت کاذب آسان است.

 

[شاخص عملکرد محصول]

 

1. LOD: حد تشخیص 200 کپی در میلی لیتر است.

2. دقت: ضریب تغییرات (CV٪) دقت Ctvaluewithinbatch≤3%.

3. ویژگی: هیچ واکنش متقابلی بین کیت و نمونه های مثبت مانند Human وجود ندارد

Coronavirus HCoV-NL63، ویروس انسانی HCoV-OC43، SARS Coronavirus، MERS

ویروس کرونا، ویروس آنفولانزای A، ویروس آنفلوانزای B یاماگاتا، ویکتوریا، ویروس آنفلوانزای H1N1،

ویروس آنفولانزا H3N2، ویروس آنفلوانزا H5N1، ویروس آنفلوانزا H7N9، سنسیتیال تنفسی

ویروس A، آدنوویروس (نوع 2)، آدنوویروس (نوع 2)، مایکوپلاسما پنومونیه، کلامیدیا

پنومونیه، سیاه سرفه، استرپتوکوک پنومونیه، راینوویروس (نوع A) و غیره.

 

[موارد احتیاط]

 

1. کل فرآیند تشخیص باید کاملاً مطابق با الزامات انجام شود

این کتابچه راهنمای کاربر در منطقه آماده سازی معرف، منطقه پردازش نمونه، و تقویت PCR

منطقه، و لباس های آزمایشی، ابزار و مواد مصرفی در هر منطقه باید باشد

به طور مستقل استفاده می شود و نمی توان آن را مخلوط کرد.

2. برای جلوگیری از تخریب RNA، فرآیند پردازش نمونه باید در دمای 0-4 درجه سانتیگراد انجام شود، و

آزمایش باید بلافاصله پس از اتمام آزمایش انجام شود.وسایل آشپزی

مواد مصرفی مورد استفاده در پردازش نمونه باید بدون هسته باشد.

3. برای هر آزمایش باید کنترل های منفی و مثبت تعیین شود.

4. تمام معرف های کیت باید به طور کامل ذوب شده و در دمای اتاق مخلوط شده و سانتریفیوژ شوند.

بلافاصله قبل از استفاده

5. تمامی کنترل های منفی و مثبت موجود در کیت باید به آماده سازی نمونه منتقل شود

منطقه و قبل از اولین استفاده جداگانه ذخیره می شود.

6. برای جلوگیری از تداخل فلورسانس، از لمس مستقیم لوله واکنش PCR با لخت خودداری کنید

دست، و از هرگونه علامت گذاری روی لوله PCRreaction اجتناب کنید.

7. پارامترهای مربوط به تقویت ابزار باید مطابق با مربوطه تنظیم شود

الزامات این راهنما، و دسته های مختلف معرف ها را نمی توان با هم مخلوط کرد.

8. ضایعات محصول در طول آزمایش باید قبل از دور ریختن سم زدایی شود.

 

[شاخص نماد]

 

[صادر کننده]

مگنوس اینترنشنال لیمیتد

 

F12، New City Internationa Mansion A، 234 Huapao Ave.

لیویانگ، استان هونان 410300 چین

 

مخاطب:Goodwellmedical@gmail.com

 

[نماینده مجاز]

 

لوتوس NL BV

Koningin Julianaplein 10, 1e Verd, 2595AA, Hague, Netherlands.