کیت تشخیص اسید نوکلئیک ویروس آبله میمون (MPV) (روش Real-time PCR)

[استفاده در نظر گرفته شده]

این کیت برای تشخیص ویروس آبله میمون (MPV) در نمونه های سرم یا اگزودای ضایعه با استفاده از واقعی استفاده می شود.
سیستم های زمان PCR

[اصل آزمون]
اصل تشخیص بلادرنگ بر اساس سنجش 5'نوکلئاز فلوروژنیک است.در طی واکنش PCR، DNA پلیمراز پروب را در انتهای 5' شکاف می دهد و تنها زمانی که پروب به DNA هدف هیبرید می شود، رنگ گزارشگر را از رنگ خاموش کننده جدا می کند.این برش منجر به سیگنال فلورسنت تولید شده توسط رنگ گزارشگر شکاف شده می شود که در زمان واقعی توسط سیستم تشخیص PCR نظارت می شود.چرخه PCR که در آن افزایش در سیگنال فلورسانس در ابتدا تشخیص داده می شود، متناسب با مقدار محصول خاص PCR است.نظارت بر شدت فلورسانس در زمان واقعی امکان تشخیص محصول انباشته شده را بدون نیاز به باز کردن مجدد لوله واکنش پس از تقویت می دهد.کیت Real Time PCR ویروس Monkeypox حاوی یک سیستم آماده برای استفاده ویژه برای تشخیص ویروس Monkeypox از طریق واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) در سیستم Real-time PCR است.Master حاوی معرف‌ها و آنزیم‌هایی برای تقویت خاص DNA ویروس Monkeypox است.فلورسانس توسط واحد نوری سیستم های زمان واقعی در طول PCR منتشر و اندازه گیری می شود.تشخیص قطعه DNA تقویت شده ویروس آبله میمون در کانال فلورمتری FAM با خاموش کننده فلورسنت BHQ1 انجام می شود.بافر استخراج DNA در کیت موجود است و از نمونه های سرم یا اگزودای ضایعه برای استخراج DNA استفاده می شود.علاوه بر این، کیت حاوی سیستمی برای شناسایی مهار احتمالی PCR با اندازه‌گیری فلورسانس Cy5 کنترل داخلی (IC) است.یک کنترل مثبت خارجی با تعریف 1×10 7 کپی در میلی لیتر ارائه می شود که امکان تعیین بار ژن را فراهم می کند.

[اجزای کیت تشخیصی]

[ابزار قابل اجرا]
کیت تشخیصی برای MA-6000، سری ABI، سری Bio-Rad، Roche LightCycler R480، Cepheid قابل استفاده است.
SmartCycler، سری Rotor-Gene و سایر ابزارهای PCR کمی چند کاناله.

[نیازمندی های نمونه]
1.انواع نمونه: نمونه های سرم یا ترشحات ضایعه

2. نمونه ها را می توان بلافاصله استخراج کرد یا در دمای 20- تا 80- درجه سانتی گراد منجمد کرد.

3. حمل و نقل نمونه های بالینی باید با مقررات محلی برای حمل و نقل عوامل اتیولوژیک مطابقت داشته باشد.

[نمونه قضاوت نتیجه]
1. اگر نمونه آزمایشی یک منحنی تقویتی معمولی نوع S را در FAM≤38 تشخیص دهد، و Cy5 دارای یک منحنی تقویت معمولی، theCtis≤38 باشد. نمونه می‌تواند MPVمثبت باشد.

2. اگر نمونه آزمایشی Ct یا Ct > 38 در کانال های FAM نداشته باشد، و یک منحنی تقویتی نوع S در کانال کنترل داخلی (Cy5) وجود داشته باشد، Ctis ≤38. نمونه را می توان MPV منفی ارزیابی کرد.

3. اگر نمونه آزمایشی فاقد منحنی تقویت نوع S معمولی (بدون مقدار Ct) یا مقدار Ct> 38 در FAM تشخیص داده شود، و کانال Cy5 دارای منحنی تقویت معمولی (بدون مقدار Ct) یا مقدار Ct> 38 نباشد، به این معنی است که کیفیت نمونه مشکل دارد یا عملکرد آن مشکل است.اگر نتیجه نامعتبر است، باید علت را پیدا کرده و از بین ببرید، دوباره نمونه را جمع آوری کنید و آزمایش را تکرار کنید (اگر نتیجه آزمایش هنوز نامعتبر است، لطفاً با شرکت تماس بگیرید).

[محدودیت های روش تشخیص]
1. نتایج آزمایش تیک تشخیصی را می توان فقط برای مرجع کلینیک استفاده کرد.تشخیص بالینی و درمان بیماران باید همراه با علائم، علائم، تاریخچه پزشکی و سایر شرایط مرتبط در نظر گرفته شود.

2. نتایج منفی کاذب ممکن است زمانی رخ دهد که غلظت dnucleicacid شناسایی شده در نمونه آزمایشی کمتر از حداقل حد تشخیص این کیت باشد.

3. مدیریت نادرست نمونه های آزمایش شده در هنگام جمع آوری، حمل و نقل، ذخیره سازی و پردازش به راحتی منجر به تخریب DNA و نتایج منفی کاذب می شود.

4. هنگامی که نمونه ها در حین جمع آوری، حمل و نقل، ذخیره سازی و پردازش به صورت متقابل آلوده می شوند، به راحتی می توان نتایج مثبت کاذب را بدست آورد.

[شاخص عملکرد محصول]
1.LOD: محدودیت شناسایی 200 کپی در میلی لیتر است.2. دقت: ضریب تغییرات (CV%) مقدار دقت در داخل دسته ≤3%.3-ویژگی: واکنش متقاطع بین نمونه های کیت و مثبت، مانند ویروس آبله کوچک، ویروس آبله گاوی، ویروس واکسن و غیره وجود دارد.

[پیش‌ها]
1. کل فرآیند تشخیص باید دقیقاً مطابق با الزامات این راهنما در منطقه آماده سازی معرف، منطقه پردازش نمونه و منطقه تقویت PCR انجام شود و لباس ها، ابزارها و مواد مصرفی آزمایشی باید به طور مستقل و غیر قابل استفاده باشند. مختلط

2. کنترل های منفی و مثبت باید برای هر آزمایش تنظیم شود.

3. تمام معرف های کیت باید به طور کامل ذوب شده و در دمای اتاق مخلوط شده و بلافاصله قبل از استفاده سانتریفیوژ شوند.

4. تمام کنترل های منفی و مثبت موجود در کیت باید به محل آماده سازی نمونه منتقل شده و قبل از اولین استفاده جداگانه نگهداری شوند.

5. برای جلوگیری از تداخل فلورسانس، از تماس مستقیم لوله واکنش PCR با دست خالی خودداری کنید و از هرگونه علامت گذاری روی لوله واکنش PCR خودداری کنید.

6. پارامترهای مربوط به تقویت ابزار باید مطابق با الزامات مربوطه در این راهنما تنظیم شوند و دسته های مختلف معرف ها را نمی توان با هم مخلوط کرد.

7. ضایعات محصول در طول آزمایش باید قبل از دور ریختن سم زدایی شود.

[فهرست نماد]

[کارگاه کارخانه]

[صادر کننده]

مگنوس اینترنشنال لیمیتد

F12، New City Internationa Mansion A، 234 Huapao Ave.

لیویانگ، استان هونان 410300 چین

مخاطب:Goodwellmedical@gmail.com

[نماینده مجاز]

لوتوس NL BV

Koningin Julianaplein 10, 1e Verd, 2595AA, Hague, Netherlands.

[محصول و استانداردها]