کیت تست یک مرحله ای PCR اسید نوکلئیک با نمونه حلق

کیت تست اسید نوکلئیک COVID-19 (SARS-COV-2) با

تست PCR در زمان واقعی که برای UALITATIV در نظر گرفته شده است

شناسایی در ژن های ORF1ab و N ویروس SARS-CoV-2

اسیدهای نوکلئیک در نمونه های حلقی (سواب اوروفارنکس،

سواب نازوفارنکس) از افرادی که مشکوک به آن هستند

COVID-19 توسط ارائه دهنده مراقبت های بهداشتی آنها.

 

[نام محصول]

 

کیت تشخیص نوکلئیک اسید نوکلئیک ویروس کرونا (COVID-19).

(روش RT-PCR بلادرنگ)

 

[امکانات]

 

››› FAST: نتایج کامل در 40-90 دقیقه، از ابتدا تا انتها!

 

• نتایج دقیق:کیت حاوی یک استاندارد داخلی برای جلوگیری از منفی کاذب است

نتایج و اطمینان از صحت نتیجه آزمایش.

• ضد آلودگی:اصل فناوری PCR "یک مرحله ای" واکنش را کاهش می دهد

زمان و از آلودگی هوا جلوگیری می کند.

• حساسیت بالا:حداقل خط پایه تشخیص 500 کپی در میلی لیتر است که

تشخیص نتایج نمونه با محتوای کم ویروس را تضمین می کند.

• توان عملیاتی بالا:سیستم واکنش سه گانه PCR، شار تشخیص بالا، به موقع و

تکمیل سریع تشخیص چند نمونه

• CE وSGS، ISO13485تایید و تایید شده است

را

[اجزای کیت تشخیصی]

خیر	نام معرف	مشخصات& تعداد		رنگ درپوش پیچ
		50T	200T
1	مخلوط COVID-19 PCR	750µl x 1 لوله	لوله 750µl x 4	رنگ قهوه ای
2	مخلوط آنزیم COVID-19	لوله 250µl x 1	لوله 250µl x 4	رنگ زرد
3	کنترل منفی COVID-19	لوله 100 میکرولیتر	لوله 100µl x 4	سبز
4	کنترل مثبت COVID-19	100 میکرولیتر x1 لوله	لوله x4 100 میکرولیتر	آبی
5	دستورالعمل ها	1 سروینگ	1 سروینگ

 

توجه داشته باشید:

1. اجزای مجموعه های مختلف کیت را مخلوط یا تعویض نکنید.

2. کنترل منفی COVID-19 آب استریل بدون هسته است و کووید-19

کنترل مثبت RNA invitro رونویسی شده است که حاوی ژن های هدف ORF1ab است،

ژن N و ژن کنترل داخلی.

 

کیت تشخیص اسید نوکلئیک ویروس کرونا رنجی یک RT-PCR بلادرنگ در شرایط آزمایشگاهی است.

تست تشخیصی در نظر گرفته شده برای تشخیص کیفی اسید نوکلئیک از

SARS-CoV-2 در نمونه‌های سواب اوروفارنکس انسان و سواب نازوفارنکس

جمع آوری شده توسط یک ارائه دهنده مراقبت های بهداشتی (HCP)، و نمونه های سواب بینی قدامی

توسط یک HCP جمع آوری شده یا تحت نظارت یک HCP توسط هر شخصی جمع آوری شده است

فردی، از جمله افرادی که علائم یا دلایل دیگری برای مشکوک بودن ندارند

کووید-۱۹.این آزمایش همچنین برای استفاده با نمونه های بزاق جمع آوری شده با استفاده از رنجی است

کیت جمع آوری بزاق یا توسط یک HCP یا خود جمع آوری شده تحت نظارت

یک HCP در یک محیط مراقبت بهداشتی از افراد مشکوک به COVID-19.

 

[استفاده در نظر گرفته شده]

 

کیت تشخیص اسید نوکلئیک ویروس کرونا رنجی برای استفاده توسط بالینی واجد شرایط در نظر گرفته شده است

پرسنل آزمایشگاهی که به طور خاص در مورد تکنیک های آموزش و آموزش دیده اند

روشهای تشخیصی Real-time PCR و in vitro.اسید نوکلئیک ویروس کرونا

کیت تشخیص فقط برای استفاده در شرایط اضطراری سازمان غذا و دارو است

از مجوز استفاده کنید.

کیت تشخیص nCoV 2019 برای تشخیص کیفی در شرایط آزمایشگاهی ORF1ab و N استفاده می شود.
ژن‌های RNA SARS-CoV-2 در سواب‌های نازوفارنکس و نمونه‌های خلط
موارد مشکوک به ذات الریه، موارد مشکوک خوشه ای آلوده به کروناویروس جدید و
سایر بیمارانی که نیاز به تشخیص یا تشخیص افتراقی کروناویروس جدید دارند
عفونتعملکرد این سنجش برای تشخیص یا کمک به تشخیص COVID-19 است.
برای تعاریف «موارد مشکوک» و «موارد مشکوک خوشه‌ای» به قسمت زیر مراجعه کنید
اسناد (نسخه فعلی) مانند "تشخیص و طرح درمان پنومونی".
آلوده به کروناویروس جدید و برنامه نظارت بر موارد ابتلا به ذات الریه
توسط رمان کروناویروس صادر شده توسط CDC.

این محصول تنها در اپیدمی پنومونی عفونت SARS-CoV-2 استفاده می شود
دسامبر 2019. تشخیص کمکی موارد مرتبط و تشخیص آزمایشگاهی
ذخیره اپیدمی این اپیدمی را نمی توان به عنوان یک تشخیص معمولی در شرایط آزمایشگاهی استفاده کرد
معرف برای کاربرد بالینیدر استفاده، الزامات مربوط به پنومونیت
طرح تشخیص و درمان عفونت کروناویروس جدید و پنومونیت
طرح پیشگیری و کنترل برای عفونت جدید کروناویروس باید رعایت شود.
برای انجام تشخیص اسید نوکلئیک کروناویروس جدید، آزمایش‌کنندگان باید انجام دهند
رویه های ایمنی زیستی و مطابق با الزامات 'راهنماهای فنی برای
پایش آزمایشگاهی پنومونی آلوده به کروناویروس جدید توسط CDC.

 

این کیت برای تشخیص COVID-19 (ژن ORF1ab/N) نوکلئیک اسید و

کمک به تشخیص و نظارت اپیدمیولوژیک COVID-19.

 

[مشخصات بسته]

50 تست / کیت و 200 تست / کیت

 

[اصل آزمون]

این کیت از اصل فناوری PCR کمی فلورسنت بلادرنگ استفاده می کند،

پرایمرها و کاوشگرهای خاصی برای COVID-19 (ژن ORF1ab/N) طراحی می کند،

و آنها را با ابزار PCR کمی فلورسنت در زمان واقعی ترکیب می کند

اسید نوکلئیک ویروس COVID-19 را شناسایی کنید.به طوری که تشخیص کیفی را تحقق بخشد

اسید نوکلئیک ویروس COVID-19.

علاوه بر این، سیستم تشخیص PCR از کنترل داخلی مثبت استفاده می کند.

که حضور مهارکننده‌های PCR را در نمونه‌های آزمایشی با تشخیص کنترل می‌کند

آیا سیگنال کنترل داخلی طبیعی است، برای جلوگیری از یک نتیجه منفی کاذب.

 

این سنجش بر اساس فناوری واکنش زنجیره ای پلیمراز بلادرنگ (PCR) است

و از یک مخلوط بهینه آماده برای استفاده با پرایمرهای خاص هدف تشکیل شده است

و کاوشگرهایی برای تشخیص SARS-CoV-2.پروب ها از یک فلوروفور تشکیل شده اند

به طور کووالانسی به انتهای 5' پروب الیگونوکلئوتیدی و یک خاموش کننده در

3'-انتها.مولکول Quencher فلورسانس ساطع شده توسط

فلوروفور هنگامی که توسط منبع نور چرخه‌ساز برانگیخته می‌شود.تا زمانی که فلوروفور

و خاموش کننده در مجاورت هستند، خاموش کردن هرگونه سیگنال فلورسانس را مهار می کند.

تخریب کاوشگر فلوروفور را از آن آزاد می کند و مجاورت را می شکند

به فقط برای استفاده اضطراری دستورالعمل برای استفاده rev.1.2 2 خاموش کننده، در نتیجه تسکین

اثر خاموش کننده و اجازه دادن به فلورسانس فلوروفور.از این رو، فلورسانس

تشخیص داده شده در سیکلر حرارتی PCR کمی به طور مستقیم به تناسب است

فلوروفور آزاد شده و مقدار الگوی DNA موجود در PCR.

 

[ابزار قابل اجرا]

 

کیت تشخیصی برای MA-6000، سری ABI، سری Bio-Rad، Roche قابل استفاده است.

LightCycler R480، Cepheid SmartCycler، سری Rotor-Gene و دیگر چند کاناله

ابزارهای کمی PCR در زمان واقعی

 

[نیازمندی های نمونه]

 

1. انواع نمونه: نمونه های دستگاه تنفسی فوقانی (از جمله سواب گلو،

سواب بینی، عصاره نازوفارنکس خلط سرفه عمیق)، دستگاه تنفسی تحتانی

نمونه ها (شامل عصاره های دستگاه تنفسی، شستشوی آلوئولی مایع لاواژ برونش)

مایع، نمونه های بیوپسی بافت ریه)، کشت بافت و نمونه های دیگر.

2. شرایط نگهداری: نمونه های جمع آوری شده باید برای بازرسی ارائه شوند

به موقع و نمونه ها باید در 24 ساعت در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری شوند.

بهتر است بیش از 24 ساعت در دمای 70 درجه سانتیگراد نگهداری شود و از یخ زدگی و ذوب مکرر خودداری شود.

چرخه ها

 

[ذخیره سازی و پایداری]

 

1. کیت تشخیصی باید در یک کیسه مهر و موم شده در دمای 5±20 درجه سانتیگراد نگهداری شود. تاریخ انقضا

12 ماه است.

2. لطفا به تاریخ ساخت و تاریخ انقضا در بسته بیرونی مراجعه کنید.

3. در صورت عدم استفاده، معرف در تاریخ انقضا معتبر و پایدار می ماند.کیت باید

منجمد نشود و بیش از 5 بار باشد.

 

[روش آزمون]

 

1. آماده سازی معرف (در "منطقه آماده سازی معرف" انجام شد)

1.1 هر جزء را از کیت تشخیصی خارج کرده و در دمای اتاق قرار دهید.

اجازه دهید معرف ها در دمای اتاق به تعادل برسند، سپس هر یک از آنها را گرداب کنید

به ترتیب برای استفاده بعدی.

1.2 با توجه به تعداد نمونه های آزمایش، کنترل مثبت COVID-19 و

کنترل منفی COVID-19، مقدار مناسب مخلوط PCR COVID-19 را پیپت کنید

و مخلوط آنزیم COVID-19 (COVID-19 PCR Mix 15 µl/test + COVID-19 آنزیم

5 میکرولیتر / آزمایش را مخلوط کنید) آنها را کاملاً مخلوط کنید تا یک مخلوط PCR-Master سانتریفیوژ شود.

فوراً برای استفاده بعدی

نام معرف	1 نمونه	10 نمونه	25 نمونه	50 نمونه	100 نمونه	200 نمونه
مخلوط COVID-19PCR (µl)	15	150	375	750	1500	3000
آنزیم COVID-19 مخلوط (µl)	5	50	125	250	500	1000
PCR-Mastermix	20	200	500	1000	2000	4000
توجه: پیکربندی بالا فقط مرجع شماست و برای اطمینان از حجم کافی PCR-Mastermix، ممکن است حجم بیشتری از پیپتینگ واقعی مورد نیاز باشد.

1.3 معرف های آماده شده فوق را به "منطقه پردازش نمونه" منتقل کنید

استفاده بعدی

 

2. پردازش و بارگذاری نمونه ها (انجام شده در "نمونه

منطقه پردازش")

2.1 این کیت تشخیصی شامل کیت استخراج RNA و DNA ویروسی نمی شود.این است

توصیه می شود از کیت استخراج RNA و DNA ویروسی تولید شده توسط Changsha Renji استفاده کنید

شرکت تجهیزات پزشکی، آموزشی ویبولیتین برای استخراج RNA ویروسی.عملیات خاص در حال انجام است

مطابق با دستورالعمل آن

2.2 20 میکرولیتر PCR-Mastermix را به لوله واکنش PCR با 5 میکرولیتر نمونه فرآوری شده فوق اضافه کنید.

کنترل مثبت کووید-19 و کنترل منفی کووید-19 و لوله را درپوش بگذارید.حمل

تشخیص کمی فلورسانس PCR در دستگاه فلورسانس PCR.

 

3-تقویت PCR (در منطقه تقویت اسید نوکلئیک انجام می شود)

3.1 لوله های واکنش PCR را در چاهک های نمونه تجهیزات تقویت قرار دهید

کنترل مثبت کووید-19 کنترل منفی کووید-19 و نمونه ها را تنظیم کنید

در دنباله مربوطه و نام نمونه ورودی تست شده است.

3.2 پارامترهای سیکل را مطابق جدول زیر برای تقویت PCR تنظیم کنید.

مراحل	درجه حرارت	زمان	چرخه ها
1	50 درجه سانتی گراد	10 دقیقه	1
2	95 درجه سانتی گراد	3 دقیقه	1
3	95 درجه سانتی گراد	دهه 10	40
	55 درجه سانتی گراد	دهه 30

توجه داشته باشید:

1) مجموعه فلورسانس روی "Step3:55°C, 30s" تنظیم شده است.انتخاب تشخیص

کانال ها: FAM، HEX و Cy5 که کانال FAM ژن ORF1ab و HEX است

کانال ژن N است.کانال Cy5 ژن کنترل داخلی و سیستم واکنش است

s روی 25 میکرولیتر تنظیم شده است.

2) دستگاه های PCR فلورسنت سری ABI کالیبراسیون ROX را انتخاب نمی کنند و انتخاب می کنند

هیچ کدام برای گروه خاموش کننده.

 

[ارزش قضاوت مثبت و فاصله مرجع]

 

1. تنظیم شرایط برای تجزیه و تحلیل نتایج

اصل تعدیل پایه و آستانه عموماً بر اساس نتایج است

تجزیه و تحلیل خودکار ابزارزمانی که شیب کلی منحنی

ظاهر می شود، مقادیر شروع، پایان و آستانه خط پایه قابل تنظیم هستند

مطابق تصویرمعمولاً کاربر می تواند آن را مطابق با واقعی تنظیم کند

وضعیت.مقدار Start را می توان روی 3-15 و مقدار End را روی 5-20 تنظیم کرد.

منحنی تقویت کنترل منفی را طوری تنظیم کنید که مستقیم یا پایین تر شود

خط نگه داشتن خرما

 

2. اعتبار کیت

2.1کنترل مثبت COVID-19:کانال های FAM، HEX و Cy 5 معمولی هستند

منحنی های تقویت نوع S و Cts≤32.

2.2کنترل منفی COVID-19:کانال های FAM، HEX و Cy 5 هیچ

Ct یا Ct>38.

2.3توجه داشته باشید:شرایط فوق باید همزمان رعایت شود، در غیر این صورت این

آزمایش نامعتبر است و باید تکرار شود.

 

3. ارزش قضاوت مثبت

از طریق مطالعه مقادیر مرجع مشخص شد که مقدار مرجع Ct

ژن هدف و ژن کنترل داخلی شناسایی شده توسط این کیت هر دو 38 بود.

 

[کنترل کیفیت]

 

محصول کیت کنترل منفی، کنترل مثبت و کنترل داخلی را به شما ارائه می دهد

پایایی نتایج را برای کل دسته نمونه ها از نمونه کنترل کنید

استخراج تا تقویت PCRتمام کنترل های تست باید قبل از بررسی مورد بررسی قرار گیرند

تفسیر نتایج بیمارکنترل مثبت، کنترل منفی و IC در مثبت

و کنترل منفی باید الزامات ذکر شده در جدول زیر را برآورده کند تا اطمینان حاصل شود

نتایج معتبراگر کنترل ها معتبر نباشند، نتایج بیمار قابل تفسیر نیستند.

 

تفسیر نتایج آزمایش کنترل برای واکنش 60 میکرولیتری:

تفسیر نتایج آزمایش کنترل برای واکنش 30 میکرولیتری:

 

تفسیر نتایج آزمایش کنترل برای واکنش 15 میکرولیتری:

1) کنترل منفی: هر دو ORF1ab و N SARS-CoV-2 نباید شناسایی شوند، و

مقدار Ct کنترل داخلی باید ≤ 40 باشد.

 

2) کنترل مثبت: هر دو ORF1abو N از SARS-CoV-2 باید شناسایی شود، و آنها

مقادیر Ct باید در داخل قرار گیرندمحدوده توصیف شده در جداول بالا، مقدار Ct از

کنترل داخلی نداردبرای کنترل مثبت ≤40 باشد.

 

[نمونه قضاوت نتیجه]

 

1. اگر نمونه آزمایشی منحنی تقویت نوع S غیر معمول را در FAM تشخیص دهد، HEX

و کانال های Cy 5 و Ct ≤38 است، نمونه می تواند COVID-19 باشد.

مثبت

2.اگر نمونه آزمایشی در کانال های FAM و HEX Ct یا Ct>38 نداشته باشد و در آنجا وجود دارد.

منحنی تقویت نوع S غیر معمول در کانال کنترل داخلی (Cy 5) است، Cts≤38،

نمونه را می توان منفی COVID-19 ارزیابی کرد.

3. اگر نمونه آزمایشی فقط دارای مقادیر Ct 38 در یک کانال واحد از FAM یا HEX باشد.

کانال، و منحنی تقویت نوع S غیر معمول در کنترل داخلی وجود دارد

کانال (Cy 5)، Ct≤38، نتایج نیاز به آزمایش مجدد دارند.اگر نتایج تکرار شوند

نمونه را می توان به عنوان مثبت COVID-19 ارزیابی کرد، نتایج تکرار می شود

منفی هستند به جز منحنی تقویت نوع S معمولی کنترل داخلی

کانال (Cy 5)، Ct≤38، که می تواند به عنوان COVID-19 منفی ارزیابی شود.

4. اگر هیچ منحنی تقویت نوع S معمولی (بدون مقدار Ct) یا مقدار Ct> 38 در

کانال های FAM، HEX و Cy 5 نمونه آزمایشی، به این معنی است که یک وجود دارد

مشکل در کیفیت نمونه یا مشکل در عملیات.اگر نتیجه

نامعتبر است، باید علت را پیدا کرده و از بین ببرید، نمونه را دوباره جمع آوری کنید،

و آزمایش را تکرار کنید (اگر نتیجه آزمایش همچنان نامعتبر است، لطفا با شرکت تماس بگیرید).

 

[محدودیت های روش تشخیص]

1. نتایج آزمایش کیت تشخیصی فقط برای مرجع کلینیک قابل استفاده است.بالینی

تشخیص و درمان بیماران باید همراه با آنها در نظر گرفته شود

علائم، علائم، سابقه پزشکی و سایر شرایط مرتبط.

2. نتایج منفی کاذب ممکن است زمانی رخ دهد که غلظت نوکلئیک شناسایی شده باشد

اسید در نمونه آزمایشی زیر حداقل حد تشخیص این کیت است.

3. جابجایی نادرست نمونه آزمایش شده در هنگام جمع آوری، حمل و نقل،

ذخیره سازی و پردازش می تواند به راحتی منجر به تخریب RNA و منفی کاذب شود

نتایج.

4. هنگامی که نمونه ها در طول جمع آوری، حمل و نقل، ذخیره سازی آلوده می شوند،

و پردازش، بدست آوردن نتایج مثبت کاذب آسان است.

 

[شاخص عملکرد محصول]

1.LOD: حد تشخیص 200 کپی در میلی لیتر است.

2.Precision: ضریب تغییرات (CV٪] مقدار Ct دقت در دسته ≤3%.

3.ویژگی: هیچ واکنش متقابلی بین کیت و نمونه های مثبت وجود ندارد

به عنوان ویروس انسانی HCoV-NL63، ویروس کرونای انسانی HCoV-OC43، SARS

Coronavirus، MERS Coronavirus، ویروس آنفولانزای A، ویروس آنفلوانزا B یاماگاتا،

ویکتوریا، ویروس آنفولانزای H1N1، ویروس آنفلوانزای H3N2، ویروس آنفلوانزای H5N1،

ویروس آنفلوانزا H7N9، ویروس سنسیتیال تنفسی A، آدنوویروس (نوع 2)،

آدنوویروس (نوع 2)، مایکوپلاسما پنومونیه، کلامیدیا پنومونیه،

سیاه سرفه، استرپتوکوک پنومونیه، راینوویروس (نوع A) و غیره

 

[موارد احتیاط]

1. کل فرآیند تشخیص باید به شدت مطابق با انجام شود

الزامات این راهنما در منطقه آماده سازی معرف، منطقه پردازش نمونه،

و ناحیه تقویت PCR، و لباس های آزمایشی، ابزار،

و مواد مصرفی در هر منطقه باید به طور مستقل استفاده شود و قابل اختلاط نباشد.

2. برای جلوگیری از تخریب RNA، فرآیند پردازش نمونه باید در عمل انجام شود

0-4 ℃، و آزمایش باید بلافاصله پس از انجام آزمایش انجام شود

تکمیل شد.مواد مصرفی ظروف مورد استفاده در پردازش نمونه باید بدون نوکلئاز باشد.

3. کنترل های منفی و مثبت باید برای هر آزمایش تنظیم شود.

4.تمام معرف های کیت باید به طور کامل ذوب شده و در دمای اتاق و مخلوط شوند

بلافاصله قبل از استفاده سانتریفیوژ می شود.

5. تمام کنترل های منفی و مثبت موجود در کیت باید به نمونه منتقل شود

منطقه آماده سازی و قبل از اولین استفاده جداگانه ذخیره می شود.

6. برای جلوگیری از تداخل فلورسانس، از دست زدن به لوله واکنش PCR خودداری کنید

مستقیماً با دست خالی و از هرگونه علامت گذاری روی لوله واکنش PCR خودداری کنید.

7. پارامترهای مربوط به تقویت ابزار باید مطابق با تنظیم شود

الزامات مربوطه در این راهنما و دسته های مختلف معرف نمی تواند

مخلوط شود

8. ضایعات محصول در طول آزمایش باید قبل از سم زدایی شوند

دور انداخته شد.

 

[اسید نوکلئیک چیست؟]

 

[شاخص نماد]

[صادر کننده]

 

مگنوس بین المللی محدود

 

F12، New City International Mansion A، 234 Huapao Ave.

لیویانگ، استان هونان 410300 چین

 

مخاطب:Goodwellmedical@gmail.com

 

[سازنده]

 

شرکت تجهیزات پزشکی چانگشا رنجی با مسئولیت محدود

 

جاده Xiangtai شماره 18، منطقه Liuyang Jingkai،

شهر چانگشا، استان هونان 410300 چین

 

[نماینده مجاز]

 

لوتوس NL BV

Koningin Julianaplein 10, 1e Verd, 2595AA, Hague, Netherlands.

[نمای کارخانه]

 

 

 

[کارگاه کارخانه]

 

 

 

[محصول و استانداردها]

 

 

[گواهینامه ها]

 

 

 

[سوالات متداول]